◎ مایکرو سویچونه د څو اړخیزه، د تقاضا پر ځای د مایع اداره کولو لپاره د باور وړ

د www.chinacdoe.com لیدو لپاره مننه.د براوزر نسخه چې تاسو یې کاروئ محدود CSS ملاتړ لري.د غوره تجربې لپاره، موږ وړاندیز کوو چې تاسو یو تازه شوی براوزر وکاروئ (یا په انټرنیټ اکسپلورر کې د مطابقت حالت غیر فعال کړئ).په ورته وخت کې، د دوامداره ملاتړ ډاډ ترلاسه کولو لپاره، موږ به سایټ پرته له سټایلونو او جاواسکریپټ وړاندې کړو.

د لابراتوار پر چپ سیسټمونه د ساحې وړتیاو سره د ګړندي او دقیق تشخیص احتمال وړاندیز کوي او د سرچینو محدود ترتیباتو کې ګټور دي چیرې چې بایو میډیکل تجهیزات او روزل شوي مسلکي کسان شتون نلري.په هرصورت، د پاملرنې د ازموینې سیسټم رامینځته کول چې په ورته وخت کې د څو کاري توزیع کولو لپاره ټول اړین ځانګړتیاوې لري، د غوښتنې پر اساس خوشې کول، د اعتبار وړ فعالیت، او د ریجنټونو اوږدمهاله ذخیره کول یوه لویه ننګونه ده.دلته موږ د لیور فعال مایکرو سفر سویچ ټیکنالوژي تشریح کوو چې کولی شي په هر لوري کې مایعات تنظیم کړي ، د پلي شوي هوا فشار ته دقیق او متناسب غبرګون چمتو کړي ، او د ناڅاپي حرکتونو او وایبریشنونو پروړاندې مستحکم پاتې شي.د ټیکنالوژۍ پراساس، موږ د پولیمیریز چین عکس العمل سیسټم پراختیا هم تشریح کوو چې د ریجنټ معرفي کول، مخلوط کول او د عکس العمل فعالیتونه ټول په یوه پروسه کې مدغم کوي، کوم چې د 18 ناروغانو څخه د ټولو کلینیکي پوزې نمونو لپاره "نمونې په ځواب کې" فعالیت ترسره کوي. د انفلوینزا او 18 انفرادي کنټرولونه، د معیاري پولیمیریز چین عکس العمل سره د فلوروسینس شدت په ښه همغږي کې (د پیرسن کوفیفینټ> 0.9).د ټیکنالوژۍ پراساس، موږ د پولیمیریز چین عکس العمل سیسټم پراختیا هم تشریح کوو چې د ریجنټ معرفي کول، مخلوط کول او د عکس العمل فعالیتونه ټول په یوه پروسه کې مدغم کوي، کوم چې د 18 ناروغانو څخه د ټولو کلینیکي پوزې نمونو لپاره "نمونې په ځواب کې" فعالیت ترسره کوي. د انفلوینزا او 18 انفرادي کنټرولونو سره، د معیاري پولیمیریز زنځیر عکس العمل سره د فلوروسینس شدت په ښه همغږي کې (د پیرسن کوفیشینټ> 0.9).Основываясь на этой технологии, мы также описываем разработку системы полимеразной цепной реакции, которая объединяет функции введения реагентов, смешивания и реакции в одном процессе, что обеспечивает выполнение «образец-в-ответ-выход» для всех клинических образцов из носа от 18 пациентов с Грипп и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флуоресценции со стандарткой полимеразной полимеразной полимеразной цепцианей на> 0,9).د دې ټیکنالوژۍ پراساس، موږ د پولیمیریز چین غبرګون سیسټم پراختیا هم تشریح کوو چې په یوه پروسه کې د انجیک کولو، مخلوط کولو، او عکس العمل کولو دندې سره یوځای کوي، د 18 انفلونزا ناروغانو څخه د ټولو کلینیکي پوزې نمونو لپاره د نمونې دننه غبرګون فعالوي.او 18 انفرادي کنټرولونه، د معیاري پولیمیریز چین عکس العمل فلوروسینس شدت سره په ښه توافق کې (د پییرسن کوفیشینټ> 0.9).د دې ټیکنالوژۍ پراساس، موږ د پولیمیریز چین غبرګون سیسټم پراختیا هم تشریح کوو چې د ریجنټ انجیکشن، مخلوط کول، او د عکس العمل فعالیتونه سره یوځای کوي ترڅو د 18 نمونې د ناک ناروغانو نمونو څخه ټول کلینیکي پوزې نمونې تحلیل کړي. انفلوینزا او 18 انفرادي کنټرولونه، د فلوروسینس شدت سره سمون لري. د معیاري پولیمیریز زنځیر عکس العمل سره ښه (د پییرسن کوفیشین> 0.9).وړاندیز شوی پلیټ فارم د بایو میډیکل تحلیلونو باوري اتومات تضمین کوي ​​او پدې توګه کولی شي د پاملرنې ازموینې وسیلو د یوې لړۍ سوداګریز کول ګړندي کړي.
راپورته کیدونکې انساني ناروغۍ لکه د 2020 COVID-19 وبا چې د ملیونونو خلکو ژوند یې اخیستی ، د نړیوال روغتیا او انساني تمدن لپاره جدي ګواښ دی.د ویروس د خپریدو د کنټرول او د درملنې د پایلو د ښه کولو لپاره د ناروغیو ژر او دقیق تشخیص مهم دی.د مرکزي لابراتوارونو پراساس اصلي تشخیصی اکوسیستم چیرې چې د ازموینې نمونې روغتونونو یا تشخیصي کلینیکونو ته لیږل کیږي او د متخصصینو لخوا پرمخ وړل کیږي دا مهال په ټوله نړۍ کې نږدې 5.8 ملیارد خلکو ته لاسرسی محدودوي ، په ځانګړي توګه هغه څوک چې د سرچینو محدود ترتیباتو کې ژوند کوي.چیرې چې د ګران بیو میډیکل تجهیزاتو او وړ متخصصینو نشتوالی شتون لري.ډاکټران 2. په دې توګه، بیړنۍ اړتیا ده چې یو ارزانه او د کاروونکي دوستانه لابراتوار په چپ سیسټم کې د پوائنټ-اف-کیر ټیسټ (POCT) وړتیا سره رامینځته شي چې کولی شي کلینیکانو ته په وخت تشخیصي معلومات چمتو کړي ترڅو د تشخیص باخبره پریکړې وکړي. .او درملنه 3.
د نړیوال روغتیا سازمان (WHO) لارښوونې په ګوته کوي چې یو مثالی POCT باید ارزانه وي، د کاروونکي دوستانه (د لږ تر لږه روزنې سره کارول اسانه وي)، دقیق (د غلطو منفي یا غلطو مثبتو څخه ډډه وکړئ)، ګړندی او د باور وړ (د ښه تکرار وړتیا چمتو کول)، او د سپارلو وړ (د اوږدې مودې ذخیره کولو وړ او د پای کاروونکو لپاره په اسانۍ سره شتون لري) 4.د دې اړتیاو پوره کولو لپاره ، د POCT سیسټمونه باید لاندې ب featuresې چمتو کړي: د لاسي مداخلې کمولو لپاره څو اړخیز خوراک ، د دقیق ازموینې پایلو لپاره د ریجنټ ټرانسپورټ اندازه کولو لپاره د غوښتنې پراساس خوشې کول ، او د چاپیریال کمپن سره مقاومت کولو لپاره معتبر فعالیت.اوس مهال، د POCT ترټولو پراخه کارول شوې وسیله د پسرلي جریان سټریپ 5,6 دی چې د نایترو سیلولوز غشا ډیری پرتونه لري چې د نمونې خورا لږ مقدار مخ په وړاندې وړي، د کیپیلري ځواک په واسطه د مخکې حرکت شوي ریجنټونو سره غبرګون کوي.که څه هم دوی د ټیټ لګښت، د کارولو اسانتیا، او چټکو پایلو ګټه لري، د جریان پټې پر بنسټ د POCT وسایل یوازې د بیولوژیکي ازموینو لپاره کارول کیدی شي (د بیلګې په توګه، د ګلوکوز ازموینې 7,8 او د امیندوارۍ ازموینې 9,10) پرته له دې چې د څو مرحلو تحلیلونو ته اړتیا ولري.عکس العملونه (د بیلګې په توګه د ډیری ریجنټونو بارول، مخلوط کول، ملټي پلیکسینګ).برسېره پر دې، هغه موټر چلوونکي ځواکونه چې د مایع حرکت کنټرولوي (د بیلګې په توګه، د کیپیلري ځواک) ښه ثبات نه ورکوي، په ځانګړې توګه د بیچونو ترمنځ، په پایله کې د خراب تولید وړتیا 11 او د 12,13 د ښه کشف لپاره په ابتدايي توګه د غاړې جریان بانډونه جوړوي.
په مایکرو او نانوسکل کې د تولید پراخه ظرفیتونو د کمیت اندازه کولو 14,15,16,17 لپاره د مایکرو فلایډیک POCT وسیلو پراختیا لپاره فرصتونه رامینځته کړي.د انٹرفیس 18، 19 او د 20، 21، 22 چینلونو جیومیټري د ملکیتونو تنظیم کولو سره، د دې وسیلو د کیپیلري ځواک او جریان کچه کنټرول کیدی شي.په هرصورت، د دوی اعتبار، په ځانګړې توګه د خورا لوند شوي مایعاتو لپاره، د تولید غلطۍ، د موادو نیمګړتیاو، او د چاپیریال ویبرونو ته حساسیت له امله د منلو وړ ندي.سربیره پردې ، ځکه چې د مایع ګاز انٹرفیس کې د کیپیلري جریان رامینځته کیږي ، هیڅ اضافي جریان نشي معرفي کیدی ، په ځانګړي توګه د مایع سره د مایکرو فلوایډیک چینل ډکولو وروسته.له همدې امله، د لا پیچلي کشف لپاره، د نمونې انجیکشن څو مرحلې باید ترسره شي 24,25.
د مایکرو فلویډیک وسیلو په مینځ کې ، سینټرفیوګل مایکرو فلایډیک وسیلې اوس مهال د POCT26,27 لپاره یو له غوره حلونو څخه دي.د دې ډرایو میکانیزم ګټور دی چې د موټر چلولو ځواک د گردش سرعت تنظیم کولو سره کنټرول کیدی شي.په هرصورت، نیمګړتیا دا ده چې مرکزي ځواک تل د وسیلې بهرنۍ څنډې ته الرښوونه کیږي، دا ستونزمن کوي ​​​​چې د ډیرو پیچلو تحلیلونو لپاره اړین څو مرحلې تعاملات پلي کړي.که څه هم اضافي چلونکي ځواکونه (د بیلګې په توګه 28، 29 او ډیری نور 30، 31، 32، 33، 34، 35) د سنټرفیوګال ځواک سربیره د څو اړخیزو خوراکونو لپاره معرفي شوي، غیر متوقع مایع لیږد لاهم واقع کیدی شي ځکه چې دا اضافي ځواکونه عموما امرونه دي. د سینټرفیوګال ځواک څخه ټیټ شدت ، دوی یوازې په وړو عملیاتي حدودو کې اغیزمن کوي ​​​​یا د مایع خوشې کیدو سره د غوښتنې سره شتون نلري.په سینټرفیوګال مایکرو فلوایډیکونو کې د نیوماتیک چلولو شاملول لکه سینټریفیوګال کاینټیک میتودونه 36, 37, 38, ترموپنومیټ میتودونه 39 او فعال نیوماتیک میتودونه 40 یو زړه راښکونکی بدیل ثابت شوی.د کاونټرفیوګوډینامیک طریقې سره، اضافي جوف او نښلونکي مایکرو چینلونه د بهرني او داخلي دواړو عملونو لپاره په وسیله کې مدغم شوي، که څه هم د پمپ کولو موثریت (د 75٪ څخه تر 90٪ پورې) د پمپ کولو دورې په شمیر او ویسکوسیت پورې اړه لري. د مایع څخه.د ترموپونیوماتیک میتود کې، د لیټیکس جھلی او د مایع لیږد چیمبر په ځانګړې توګه ډیزاین شوي ترڅو د انلیټ مهر یا بیا پرانستل شي کله چې د بند شوي هوا حجم تودوخه یا یخ شي.په هرصورت، د تودوخې / یخولو ترتیب د ورو غبرګون ستونزې معرفي کوي او د تودوخې حساسیت ارزونې کې د هغې کارول محدودوي (د بیلګې په توګه، د پولیمیریز چین غبرګون (PCR) پراخول).د فعال نیوماتیک چلند سره ، د غوښتنې پراساس خوشې کول او داخلي حرکت د مثبت فشار او دقیق ډول سره د لوړ سرعت موټرو لخوا د څرخي سرعت سره یوځای غوښتنلیک له لارې ترلاسه کیږي.نورې بریالۍ تګلارې شتون لري چې یوازې د نیوماتیک عمل کونکي کاروي (مثبت فشار 41، 42 یا منفي فشار 43) او په نورمال ډول تړل شوي والو ډیزاینونه.په نیوماتیک چیمبر کې په پرله پسې ډول د فشار په پلي کولو سره ، مایع په پیریسټالټیک ډول مخکې پمپ کیږي ، او په نورمال ډول تړل شوی والو د پیریسټالسیس له امله د مایع بیرته جریان مخه نیسي ، پدې توګه پیچلي مایع عملیات احساسوي.په هرصورت، اوس مهال یوازې یو محدود شمیر مایکرو فلوایډیک ټیکنالوژي شتون لري چې کولی شي په یوه واحد POCT وسیلې کې پیچلي مایع عملیات ترسره کړي، په شمول د څو-فعالی توزیع، د غوښتنې پر بنسټ خوشې کول، د اعتبار وړ فعالیت، اوږدمهاله ذخیره، د لوړ ویسکوسیټي مایعاتو اداره کول، او ارزانه تولید.ټول په ورته وخت کې.د څو مرحلې فعال عملیاتو نشتوالی هم ممکن یو له لاملونو څخه وي چې ولې یوازې یو څو سوداګریز POCT محصولات لکه سیفایډ ، بنکس ، ویسبي ، کوباس لیټ ، او رونډا تر نن نیټې په خلاص بازار کې په بریالیتوب سره معرفي شوي.
پدې مقاله کې ، موږ د شنه حلقې مایکرو سویچ ټیکنالوژۍ (FAST) پراساس د نیوماتیک مایکرو فلوایډیک عمل کونکي وړاندیز کوو.FAST ټول اړین ملکیتونه په ورته وخت کې د مایکرو لیټرو څخه تر ملی لیټرو پورې د پراخه ریجنټونو لپاره ترکیب کوي.FAST د لچک لرونکي جھلیو، لیورونو او بلاکونو څخه جوړ دی.د هوا فشار پلي کولو پرته ، غشا ، لیورونه او بلاکونه په کلکه تړل کیدی شي او دننه مایع د اوږدې مودې لپاره زیرمه کیدی شي.کله چې مناسب فشار تطبیق شي او د لیور اوږدوالی سره تنظیم شي، ډایفرام پراخیږي او لیور خلاص موقعیت ته فشار ورکوي، د مایع د تیریدو اجازه ورکوي.دا د مایعاتو څو اړخیزه اندازه کولو ته اجازه ورکوي په یوه کاسکیډ، یوځل، ترتیب یا انتخابي ډول.
موږ د FAST په کارولو سره د PCR سیسټم رامینځته کړی ترڅو د انفلونزا A او B ویروسونو (IAV او IBV) موندلو لپاره د نمونې ځواب پایلې رامینځته کړي.موږ د 102 کاپي / mL د کشف ټیټ حد (LOD) ترلاسه کړ، زموږ ملټي پلیکس ارزونه د IAV او IBV لپاره ځانګړتیا ښودلې او د انفلونزا ویروس پیټوټایپینګ ته اجازه ورکوي.د کلینیکي ازموینې پایلې د 18 ناروغانو او 18 صحي اشخاصو څخه د پوزې سویب نمونې په کارولو سره د معیاري RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) سره د فلوروسینس شدت کې ښه همغږي ښیې.د کلینیکي ازموینې پایلې د 18 ناروغانو او 18 صحي اشخاصو څخه د پوزې سویب نمونې په کارولو سره د معیاري RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) سره د فلوروسینس شدت کې ښه همغږي ښیې.Результаты клинических испытаний с использованием образца мазка из носа от 18 пациентов и 18 здоровых лици показатевых использованием нсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦР (коэффициенты Пирсона > 0,9).د 18 ناروغانو او 18 صحي اشخاصو څخه د پوزې سویب نمونې په کارولو سره د کلینیکي ازموینو پایلې د معیاري RT-PCR (Pearson Coefficients> 0.9) د فلوروسینس شدت ترمنځ ښه موافقه ښیې.0.9) ……………………………………. Результаты клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков от 18 пациентов и 18 здоровых лица пациентов ду интенсивностью флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (коэфициент Пирсона > 0,9).د 18 ناروغانو او 18 صحي اشخاصو څخه د پوزې سویب نمونو په کارولو سره د کلینیکي ازموینو پایلې د فلوروسینس شدت او معیاري RT-PCR (Pearson Coefficient> 0.9) ترمنځ ښه موافقه ښودلې.د FAST-POCT وسیلې اټکل شوي مادي لګښت نږدې US$ 1 (ضمنی جدول 1) دی او د لوی پیمانه تولید میتودونو (د بیلګې په توګه د انجیکشن مولډینګ) په کارولو سره نور هم کم کیدی شي.په حقیقت کې، د FAST پر بنسټ د POCT وسیلې ټول اړین ځانګړتیاوې لري چې د WHO لخوا ټاکل شوي او د نوي بایو کیمیکل ازموینې میتودونو سره مطابقت لري لکه د پلازما تودوخې سایکلینګ 44، د امپلیفیکیشن فری امیونوساسیس 45 او د نانوبوډ فعالیت ازموینې 46 چې د POCT سیسټمونو ملا ده.امکان
په انځر.1a د FAST-POCT پلیټ فارم جوړښت ښیې، کوم چې څلور مایع چیمبرونه لري: د ذخیره کولو دمخه چیمبر، د مخلوط کولو چیمبر، د غبرګون چیمبر، او د ضایع چیمبر.د مایع جریان کنټرول کلیدي د FAST ډیزاین (د لچک لرونکي جھلیو، لیورونو او بلاکونو څخه جوړ دی) د ذخیره کولو دمخه او د مخلوط کولو چیمبر کې موقعیت لري.د نیوماتیک ډول عمل شوي میتود په توګه ، FAST ډیزاین د مایع جریان دقیق کنټرول چمتو کوي ، پشمول د تړل / خلاص سویچنګ ، څو اړخیز ډوز کول ، د غوښتنې پراساس مایع خوشې کول ، د اعتبار وړ عملیات (د مثال په توګه ، د چاپیریال وایبریشن ته حساسیت) ، او اوږدمهاله ذخیره کول.د FAST-POCT پلیټ فارم څلور پرتونه لري: د ملاتړ پرت، یو لچکدار فلم پرت، د پلاستيکي فلم پرت، او د پوښ پرت، لکه څنګه چې په انځور 1b کې په پراخ شوي لید کې ښودل شوي (په اضافي شکل S1 او S2 کې هم په تفصیل سره ښودل شوي. ).ټول کانالونه او د مایعاتو ترانسپورت چیمبرونه (لکه د ذخیره کولو دمخه او د عکس العمل چیمبرونه) په PLA (پولیلیکیک اسید) کې ځای په ځای شوي دي چې د 0.2 ملي میتر (نړینۍ برخې) څخه تر 5 ملي میتر ضخامت پورې دي.د لچک لرونکي فلم مواد د 300 µm ضخامت PDMS دی چې په اسانۍ سره پراخیږي کله چې د هوا فشار د هغې د "پتلی ضخامت" او د لچک کم ماډل (شاوخوا 2.25 MPa47) له امله پلي کیږي.د پولیتیلین فلم پرت د 100 µm ضخامت سره د پولی ایتیلین terephthalate (PET) څخه جوړ شوی ترڅو د هوا د فشار له امله د ډیر خرابیدو څخه د لچک لرونکي فلم ساتنه وکړي.د چیمبرونو سره په مطابقت کې، د سبسټریټ طبقه لیورونه لري چې د پوښ پوښ (PLA څخه جوړ شوي) سره نښلول شوي ترڅو د مایع جریان کنټرول کړي.لچک لرونکي فلم د دوه اړخیزه چپکونکي ټیپ (ARseal 90880) په کارولو سره د ملاتړ پرت ته چپک شوی او د پلاستيکي فلم پوښل شوی.درې پرتونه د پوښ پرت کې د T-کلیپ ډیزاین په کارولو سره په سبسټریټ کې راټول شوي.T-clamp د دوو پښو تر مینځ واټن لري.کله چې کلپ په نالی کې داخل شو، دواړه پښې لږ څه راښکته شوې، بیا بیرته خپل اصلي حالت ته راستانه شوي او د نالی څخه د تیریدو په وخت کې د پوټکي او شاتړ سره تړل کیږي (اضافی شکل S1).څلور پرتونه بیا د نښلونکو په کارولو سره راټول شوي.
د پلیټ فارم سکیمیک ډیاګرام د FAST مختلف فعالې برخې او ځانګړتیاوې په ګوته کوي.ب د FAST-POCT پلیټ فارم لوی شوی ډیاګرام.c د متحده ایالاتو د څلورمې ډالر سکې تر څنګ د پلیټ فارم عکس.
د FAST-POCT پلیټ فارم کاري میکانیزم په 2 شکل کې ښودل شوی. کلیدي برخې د اساس پرت بلاکونه او د پوښ پرت کې ځړول دي چې د مداخلې ډیزاین پایله لري کله چې څلور پرتونه د T-شکل په کارولو سره راټول شي. .کله چې د هوا فشار نه وي پلي کیږي (انځر 2a)، د مداخلې فټ د دې لامل کیږي چې د کنډک کنډک او خراب شي، او د سیل کولو ځواک د لیور له لارې پلي کیږي ترڅو د بلاک په وړاندې لچک لرونکي فلم فشار ورکړي، او د مهر په غار کې مایع تعریف شوي. د مهر شوي دولت په توګه.دا باید په پام کې ونیول شي چې په دې حالت کې، لیور بهر ته ځوړند دی، لکه څنګه چې په انځور 2a کې د اړخ لید کې ښودل شوي.کله چې هوا ورکړل شي (انځور 2b)، لچک لرونکي غشا د پوښ په لور پراخیږي او لیور پورته کوي، په دې توګه د لیور او بلاک تر مینځ فاصله پرانیزي ترڅو مایع راتلونکي چیمبر ته لاړ شي، کوم چې د خلاص حالت په توګه تعریف شوی. .د هوا د فشار د خوشې کیدو وروسته، لیور کولی شي خپل اصلي حالت ته راستانه شي او د قناعت د لچک له امله سخت پاتې شي.د لیور حرکتونو ویډیو په ضمیمه فلم S1 کې وړاندې کیږي.
الف. د تړلو پر مهال سکیمیک ډیاګرام او عکسونه.د فشار په نشتوالي کې، لیور د بلاک په وړاندې جھلی فشاروي، او مایع مهر شوی.ب په ښه حالت کې.کله چې فشار تطبیق شي، غشا پراخیږي او لیور پورته کوي، نو چینل خلاصیږي او مایع جریان کولی شي.c د مهم فشار ځانګړتیا اندازه مشخص کړئ.په ځانګړتیاو ابعادو کې د لیور اوږدوالی (L) ، د سلیډر او هینګ (l) ترمینځ فاصله او د لیور پروټروژن ضخامت (t) شامل دي.Fs د تروټل پوائنټ B کې د ترکیب ځواک دی. q په لیور کې په مساوي ډول توزیع شوی بار دی.Tx* هغه تورک استازیتوب کوي چې د هینګ شوي لیور لخوا رامینځته شوی.نازک فشار هغه فشار دی چې د لیور لوړولو او د مایع جریان رامینځته کولو لپاره اړین دی.د نازک فشار او د عنصر اندازې ترمنځ د اړیکو نظري او تجربې پایلې.n = 6 خپلواکې تجربې ترسره شوې او ډاټا د ± معیاري انحراف په توګه ښودل شوي.خام ډاټا د خام ډیټا فایلونو په توګه وړاندې کیږي.
د بیم تیوري پراساس یو تحلیلي ماډل رامینځته شوی ترڅو د حساس فشار پی سی انحصار تحلیل کړي چیرې چې تشه په جیومیټریک پیرامیټرونو کې خلاصیږي (د مثال په توګه ، L د لیور اوږدوالی دی ، l د بلاک او د بند تر مینځ فاصله ده. قبضه، S لیور دی د مایع سره د تماس ساحه د لیور پروټروژن ضخامت دی، لکه څنګه چې په انځور کې ښودل شوي. 2c).لکه څنګه چې په ضمیمه یادښتونو او اضافي شکل S3 کې توضیح شوي، خلا هغه وخت خلاصیږي کله چې \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\)، چیرته چې Fs تورک دی. \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) ترڅو د مداخلې سره تړلي ځواکونه له منځه یوسي او د زنګ وهلو لامل شي.تجربوي غبرګون او تحلیلي ماډل ښه تړون (انځور 2d) ښیي، دا ښیي چې مهم فشار Pc د t/l په زیاتوالي او د L په کمیدو سره زیاتیږي، کوم چې په اسانۍ سره د کلاسیک بیم ماډل لخوا تشریح کیږي، د بیلګې په توګه د تورک د t/Lift سره زیاتیږي. .په دې توګه، زموږ نظري تحلیل په روښانه توګه ښیي چې مهم فشار د لیور اوږدوالی L او t/l تناسب تنظیم کولو سره په مؤثره توګه کنټرول کیدی شي، کوم چې د FAST-POCT پلیټ فارم ډیزاین لپاره مهم اساس چمتو کوي.
د FAST-POCT پلیټ فارم څو اړخیز توزیع چمتو کوي (په شکل 3a کې د انسیټ او تجربې سره ښودل شوي) ، کوم چې د بریالي POCT ترټولو مهم خصوصیت دی ، چیرې چې مایعات په هر لوري او هر ترتیب کې جریان کولی شي (کاسکیډ ، یوځل ، ترتیب) یا انتخابي ملټي چینل توزیع کول- د خوراک کولو فعالیت.په انځر.3a(i) د cascaded dosing mode ښیي په کوم کې چې دوه یا ډیر چیمبرونه د بلاکونو په کارولو سره د مختلف عکس العملونو جلا کولو او یو لیور د خلاص او تړل شوي حالتونو کنټرول لپاره کاسکیډ شوي.کله چې فشار تطبیق شي، مایع له پورتنۍ برخې څخه ښکته خونې ته په کاسکیډ ډول تیریږي.دا باید په پام کې ونیول شي چې د کاسکیډ چیمبرونه د لوند کیمیاوي موادو یا وچو کیمیاوي موادو لکه لیوفیلیز پوډر څخه ډک کیدی شي.په انځور کې په تجربه کې 3a(i)، د پورتنۍ خونې څخه سور رنګ د نیلي رنګ پوډر (د مسو سلفیټ) سره دویمې خونې ته تیریږي او کله چې ښکته خونې ته ورسیږي تور نیلي بدلیږي.دا د مایع پمپ کولو لپاره د کنټرول فشار هم ښیې.په ورته ډول، کله چې یو لیور له دوو چیمبرونو سره وصل وي، دا د یوځل انجیکشن حالت بدلیږي، لکه څنګه چې په انځور کې ښودل شوي.3a(ii)، په کوم کې چې مایع په دوه یا ډیرو چیمبرونو کې په مساوي ډول ویشل کیدی شي کله چې فشار پلي کیږي.څرنګه چې مهم فشار د لیور په اوږدوالي پورې اړه لري، د لیور اوږدوالی د ترتیب شوي انجیکشن نمونې ترلاسه کولو لپاره تنظیم کیدی شي لکه څنګه چې په انځور کې ښودل شوي.3a(iii).یو اوږد لیور (د جدي فشار سره Pc_long) د چیمبر B سره وصل شوی و او یو لنډ لیور (د جدي فشار سره Pc_short> Pc_long) د چیمبر A سره وصل شوی و. لکه څنګه چې فشار P1 (Pc_long <P1 <Pc_short) پلي شوی و، یوازې مایع په سور رنګ کې کولی شي B چیمبر ته جریان ورکړي او کله چې فشار P2 (> Pc_short) ته لوړ شي ، نیلي مایع کولی شي چیمبر A ته وګرځي. دا ترتیبي انجیکشن حالت په مختلف مایعاتو باندې پلي کیږي چې په ترتیب سره خپلو اړوندو چیمبرونو ته لیږدوي ، کوم چې د بریالي POCT لپاره مهم دی. وسیلهیو اوږد لیور (د جدي فشار سره Pc_long) د چیمبر B سره وصل شوی و او یو لنډ لیور (د جدي فشار سره Pc_short> Pc_long) د چیمبر A سره وصل شوی و. لکه څنګه چې فشار P1 (Pc_long Pc_short) ته لوړ شي ، نیلي مایع کولی شي چیمبر A ته وګرځي. دا ترتیبي انجیکشن حالت په مختلف مایعاتو باندې پلي کیږي چې په ترتیب سره خپلو اړوندو چیمبرونو ته لیږدوي ، کوم چې د بریالي POCT لپاره مهم دی. وسیلهДлинный рычаг (с критическим давлением PC_long) был соединен с камерой B, а короткий рычаг (с критическим давлением Pc_long Pc_long) с камерой A. При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) только жидкость, выделенная красным может течь камеру B, и когда давление было увеличено до P2 (> Pc_short)، синяя жидкость может течь в камеру A я к различным жидкостям, последовательно перемещаемым в соответствующие камеры, что имеет решающее значейние дл.یو اوږد لیور (د جدي فشار سره Pc_long) د چیمبر B سره وصل شوی و، او یو لنډ لیور (د مهم فشار سره Pc_short> Pc_long) د چیمبر A سره وصل شوی و. کله چې فشار P1 (Pc_long Pc_short) ته لوړ شي، نیلي مایع کولی شي چیمبر A ته وګرځي. دا ترتیب شوي انجیکشن طریقه په مختلفو مایعاتو کې پلي کیږي چې په ترتیب سره اړوندو چیمبرونو ته لیږدول کیږي، کوم چې خورا مهم دی. د بریالي POCT لپاره.وسیله Длинный рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическое давление Pc_short) > Pc_short.اوږده بازو (کمزوري فشار Pc_long) د چیمبر B سره وصل دی او لنډ لاس (کریټیکل فشار Pc_short> Pc_long) د چیمبر A سره وصل دی.При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) A может поступать синяя жидкость.کله چې فشار P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) تطبیق شي، یوازې سور مایع کولی شي B چیمبر ته ننوځي، او کله چې فشار P2 (> Pc_short) ته لوړ شي، نیلي مایع کولی شي چیمبر A ته ننوځي. دا ترتیب شوي انجیکشن حالت د ترتیب شوي لیږد لپاره مناسب دی. په اړوندو چیمبرونو کې مختلف مایعات، کوم چې د POCT وسیلې بریالي عملیات لپاره مهم دي.شکل 3a(iv) د انتخابي انجیکشن حالت ښیې ، چیرې چې اصلي چیمبر یو لنډ (د جدي فشار سره Pc_short) او اوږد لیور (د جدي فشار سره Pc_long <Pc_short) درلود چې په ترتیب سره د چیمبر A او چیمبر B سره وصل و ، سربیره پردې. بل هوایی چینل ته چې د چیمبر B سره وصل دی. چیمبر A ته د مایع لیږدولو لپاره لومړی، فشار P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) او P2 (P2> P1) د P1 + P2 > Pc_short سره په ورته وخت کې وسیله ته تطبیق شوي.شکل 3a(iv) د انتخابي انجیکشن حالت ښیې ، چیرې چې اصلي چیمبر یو لنډ (د جدي فشار سره Pc_short) او اوږد لیور (د جدي فشار سره Pc_long P1) د P1 + P2 > Pc_short سره په ورته وخت کې وسیله ته تطبیق شوي.په انځر.3a(iv) показан режим селективного впрыска, при котором основная камера имела короткий (с критическим давлением Pc_short) давлением Pc_long < Pc_short)، которые дополнительно соединялись с камерой A и камерой B соответственно.3a(iv) د انتخابي انجیکشن حالت ښیې ، په کوم کې چې اصلي چیمبر لنډ (د جدي فشار سره Pc_short) او اوږد لیور (د جدي فشار سره Pc_long P1)، د P1 + P2 > PC_short.بل هوایی چینل ته چې د چیمبر B سره وصل دی. لومړی چیمبر A ته د مایع لیږدولو لپاره، فشارونه P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) او P2 (P2 > P1) په یو وخت کې په وسیله باندې پلي شوي، چیرته چې P1 + P2 > Pc_short. 3а(iv) показан режим селективного впрыска, когда основная камера имеет короткий стержень (с критическим давлением давлением давлением давлением давлением) тическим давлением PC_long < Pc_short)، соединеные с камерой A и камерой B соответственно, и в дополнение к другомудукамука подключенному к комнате B.3a(iv) د انتخابي انجیکشن حالت ښیې کله چې اصلي چیمبر لنډ ډډ ولري (کریټیکل فشار Pc_short) او اوږد ډډ (کریټیکل فشار Pc_long <Pc_short) په ترتیب سره د چیمبر A او چیمبر B سره وصل وي ، او د بل هوایی تیریدو سربیره ، د B خونې سره نښلول.په دې توګه، P2 چیمبر B ته د مایع د ننوتلو مخه نیسي؛په عین وخت کې، د P1 + P2 ټول فشار د C چیمبر A سره تړلی لنډ لیور فعالولو لپاره د مهم فشار څخه ډیر شو ترڅو A چیمبر ته د مایع جریان اجازه ورکړي. بیا، کله چې د B چیمبر ډکولو ته اړتیا وه، موږ یوازې د P1 پلي کولو ته اړتیا لرو (Pc_long < P1 < Pc_short) په اصلي چیمبر کې د اوږد لیور فعالولو لپاره او مایع ته اجازه ورکوي چې چیمبر B ته تیر شي. دا په روښانه توګه لیدل کیدی شي چې د 3 s څخه تر 9 s پورې وخت کې چې په چیمبر A کې مایع ثابت پاتې وي پداسې حال کې چې دا په چیمبر کې لوړ شوی. B کله چې فشار P1 تطبیق شو.په عین وخت کې، د P1 + P2 ټول فشار د C چیمبر A سره تړلی لنډ لیور فعالولو لپاره د مهم فشار څخه ډیر شو ترڅو A چیمبر ته د مایع جریان اجازه ورکړي. بیا، کله چې د B چیمبر ډکولو ته اړتیا وه، موږ یوازې د P1 پلي کولو ته اړتیا لرو (Pc_long < P1 < Pc_short) په اصلي چیمبر کې د اوږد لیور فعالولو لپاره او مایع ته اجازه ورکوي چې چیمبر B ته تیر شي. دا په روښانه توګه لیدل کیدی شي چې د 3 s څخه تر 9 s پورې وخت کې چې په چیمبر A کې مایع ثابت پاتې وي پداسې حال کې چې دا په چیمبر کې لوړ شوی. B کله چې فشار P1 تطبیق شو.Между тем, общее давление P1 + P2 превысило критическое давление, чтобы активировать более короткий рычаг, сноевказобый рычаг лить жидкости течь в камеру A. Затем, когда требуется заполнить камеру B, нам нужно только применить P1 (Pc_long < P1 < Phort ) в основной камере, чтобы активировать длинный рычаг и дать жидкости течь в камеру B. Можно ясно наблюдать, tжсодать = чтобы дкость в камере A оставалась постоянной, в то время как в камере она увеличивалась.په عین وخت کې، د P1 + P2 ټول فشار د مهم فشار څخه ډیر شوی ترڅو د چیمبر A سره تړلی لنډ لیور فعال کړي ترڅو مایع A چیمبر ته جریان ورکړي. بیا کله چې د B چیمبر ډکولو ته اړتیا وي، موږ یوازې د P1 (Pc_long په ورته وخت کې، ټول فشار P1 + P2 د مهم فشار څخه ډیر دی، د لنډ لیور سره نښلونکي چیمبر A فعالوي، چې مایع ته اجازه ورکوي چې A چیمبر ته جریان ورکړي.کله چې د A چیمبر ډکولو وخت وي، موږ په ساده ډول په اصلي چیمبر کې P1 او په ثانوي چیمبر کې P2 پلي کوو.په دې توګه، د جریان چلند په انتخابي ډول د کیمرې A او B تر مینځ بدل کیدی شي. د څلور څو اړخیزه توزیع حالتونو جریان چلند په ضمیمه فلم S2 کې موندل کیدی شي.
د څو اړخیزه دندې بیلګه، لکه (i) cascading، (ii) یو ځای، (iii) ترتیب، او (iv) انتخابي دنده.منحني د دې څلورو ویشلو حالتونو د کاري فلو او پیرامیټونو استازیتوب کوي.b په ډیونیز شوي اوبو او ایتانول کې د اوږدې مودې ذخیره کولو ازموینې پایلې.n = 5 خپلواکې تجربې ترسره شوې او ډاټا د ± sd c په توګه ښودل شوي.د ثبات ازموینې مظاهرې کله چې FAST وسیله او د کیپیلري والو (CV) وسیله په (i) جامد او (ii) متحرک حالتونو کې و.(iii) د FAST او CV وسیلو لپاره حجم په پرتله وخت په مختلفو زاویو فریکونسیو کې.د (i) FAST وسیلې او (ii) CV وسیلې په غوښتنه د ازموینې پایلو خپرول.(iii) د FAST او CV وسیلو لپاره د وخت او وخت ترمنځ اړیکه د متقابل فشار حالت په کارولو سره.ټول پیمانه بارونه، 1 سانتي متره.خام معلومات د خام ډیټا فایلونو په توګه چمتو شوي.
د ریجنټونو اوږدمهاله ذخیره د بریالۍ POCT وسیلې بله مهمه ځانګړتیا ده چې غیر روزل شوي پرسونل ته به اجازه ورکړي چې ډیری ریجنټونه اداره کړي.پداسې حال کې چې ډیری ټیکنالوژیو د اوږدې مودې ذخیره کولو لپاره خپل ظرفیت ښودلی دی (د بیلګې په توګه، 35 مایکرو ډیسپینسرونه، 48 بلیسټر پیکونه، او 49 سټیک پیک)، د کڅوړې ځای په ځای کولو لپاره وقف شوي ترلاسه کولو کمپارټ ته اړتیا ده، کوم چې لګښت او پیچلتیا زیاتوي؛برسېره پردې، د ذخیره کولو دا میکانیزمونه د غوښتنې پر اساس توزیع کولو ته اجازه نه ورکوي او په بسته بندۍ کې د پاتې کیدو له امله د ریجنټونو ضایع کیدو المل کیږي.د اوږدې مودې ذخیره کولو وړتیا د CNC ماشین شوي PMMA موادو په کارولو سره د ګړندي ژوند ازموینې په ترسره کولو سره تایید شوې چې د هغې د لږ سختوالي او د ګاز جریان ته مقاومت له امله (اضافی شکل S5).د ازموینې وسیله د 9 ورځو لپاره په 65 ° C کې د deionized اوبو (deionized اوبو) او 70٪ ایتانول (د انډول کولو بې ثباته ریجنټ) څخه ډکه شوې وه.دواړه deionized اوبه او ایتانول د المونیم ورق په کارولو سره زیرمه شوي ترڅو له پورته څخه د لاسرسي مخه ونیسي.په ادبیاتو کې راپور شوي د ارینیوس معادلې او د ننوتلو فعالیت انرژي د ریښتیني وخت معادل محاسبه کولو لپاره کارول شوې.په انځر.3b د 5 نمونو لپاره د اوسط وزن کمولو پایلې ښیې چې د 9 ورځو لپاره په 65°C کې زیرمه شوي، د 0.30% سره مساوي د deionized اوبو لپاره او 0.72% د 70% ایتانول لپاره د 2 کلونو لپاره په 23°C کې.
په انځر.3c د کمپن ازموینه ښیي.څرنګه چې د کیپیلري والو (CV) د موجوده POCT28,29 وسیلو په مینځ کې د مایع اداره کولو خورا مشهور میتود دی ، د پرتله کولو لپاره د CV وسیله 300 µm پراخه او 200 µm ژوره کارول شوې.دا لیدل کیدی شي کله چې دواړه وسیلې سټیشن پاتې شي ، د FAST-POCT پلیټ فارم سیل کې مایع او د CV وسیلې کې مایع د چینل د ناڅاپي پراخیدو له امله بندیږي ، کوم چې د کیپیلري ځواک کموي.په هرصورت، لکه څنګه چې د اوربیټل وایبرټر زاویه فریکونسۍ زیاتیږي، د FAST-POCT پلیټ فارم کې مایع بند پاتې کیږي، مګر د CV وسیله کې مایع ښکته خونې ته تیریږي (د اضافي فلم S3 هم وګورئ).دا وړاندیز کوي چې د FAST-POCT پلیټ فارم د خرابیدو وړ ځړونکي کولی شي ماډل ته قوي میخانیکي ځواک پلي کړي ترڅو په چیمبر کې مایع په کلکه وتړي.په هرصورت ، په CV وسیلو کې ، مایع د جامد ، هوا او مایع مرحلو ترمینځ توازن له امله ساتل کیږي ، بې ثباتي رامینځته کوي ، او وایبریشنونه کولی شي توازن ګډوډ کړي او د غیر متوقع جریان چلند لامل شي.د FAST-POCT پلیټ فارم ګټه دا ده چې دا د باور وړ فعالیت چمتو کوي او د وایبریشنونو په شتون کې د ناکامیو مخه نیسي چې معمولا د تحویل او عملیاتو پرمهال پیښیږي.
د FAST-POCT پلیټ فارم بله مهمه ځانګړتیا د هغې د غوښتنې پراساس خوشې کول دي ، کوم چې د کمیتي تحلیل لپاره کلیدي اړتیا ده.په انځر.3d د FAST-POCT پلیټ فارم او CV وسیله د غوښتنې پر اساس خوشې کول پرتله کوي.له انځر څخه.3d (iii) موږ ګورو چې FAST وسیله د فشار سیګنال ته ګړندي ځواب ورکوي.کله چې د FAST-POCT پلیټ فارم کې فشار پلي شو، مایع جریان شو، کله چې فشار خپور شو، جریان سمدلاسه ودرول شو (انځور 3d(i)).دا کړنه د هینګ د چټک لچک بیرته راستنیدو لخوا تشریح کیدی شي، کوم چې لیور بیرته د بلاک په وړاندې فشاروي، چیمبر بندوي.په هرصورت، د CV وسیلې کې مایع جریان ته دوام ورکړ، په پایله کې د فشار د خوشې کیدو وروسته د شاوخوا 100 μl غیر متوقع مایع حجم پایله شوه (شکل 3d(ii) او اضافي فلم S4).دا د لومړي انجیکشن وروسته د CV بشپړ لوند کیدو سره د کیپیلري پنینګ اغیزې له لاسه ورکولو سره توضیح کیدی شي.
په ورته وسیلې کې د مختلف لندبل او ویسکوسیټي مایعاتو اداره کولو وړتیا د POCT غوښتنلیکونو لپاره ننګونه پاتې ده.ضعیف رطوبت کولی شي په کانالونو کې د لیک یا نورو غیر متوقع جریان چلند لامل شي ، او اړوند تجهیزات لکه وورتیکس مکسرونه ، سینټرفیوژونه او فلټرونه اکثرا د خورا ویسکوس مایعاتو چمتو کولو لپاره اړین دي 52.موږ د جدي فشار او مایع ملکیتونو ترمنځ اړیکه ازموینه وکړه (د پراخه لندبل او ویسکوسیت سره).پایلې په جدول 1 او ویډیو S5 کې ښودل شوي.دا لیدل کیدی شي چې د مختلف رطوبت او ویسکوسیت مایعات په چیمبر کې مهر کیدی شي، او کله چې فشار تطبیق شي، حتی د 5500 cP پورې د ویسکوسیت سره مایع هم نږدې خونې ته لیږدول کیدی شي، دا د دې امکان برابروي چې د لوړ کیفیت نمونې کشف کړي. viscosity (د بیلګې په توګه سپتوم، یو ډیر ویسکوس نمونه چې د تنفسي ناروغیو تشخیص لپاره کارول کیږي).
د پورتنیو څو اړخیزو توزیع کولو وسیلو په ترکیب سره ، د FAST میشته POCT وسیلو پراخه لړۍ رامینځته کیدی شي.یوه بیلګه په 1 شکل کې ښودل شوې. نبات د ذخیره کولو دمخه خونه، د مخلوط کولو خونه، د غبرګون خونه او د ضایع خونه لري.ریجنټونه ممکن د ذخیره کولو دمخه په خونه کې د اوږدې مودې لپاره زیرمه شي او بیا د مخلوط کولو خونې ته خارج شي.د سم فشار سره، مخلوط عکس العملونه په انتخابي ډول د فاضله خونې یا عکس العمل خونې ته لیږدول کیدی شي.
ځکه چې د PCR کشف د رنځجن کشف کولو لپاره د سرو زرو معیار دی لکه H1N1 او COVID-19 او د عکس العمل ډیری مرحلې پکې شاملې دي ، موږ د PCR کشف لپاره د FAST-POCT پلیټ فارم د غوښتنلیک په توګه کارولی.په انځر.4 د FAST-POCT پلیټ فارم په کارولو سره د PCR ازموینې پروسه ښیې.لومړی، eluting reagent، مقناطیسي مایکروبیډ reagent، د مینځلو محلول A، او د مینځلو محلول W په ترتیب سره د ذخیره کولو دمخه چیمبرونو E، M، W1 او W2 کې پایپ شوي.د RNA جذب مرحلې په انځور کې ښودل شوي.4a او په لاندې ډول دي: (1) کله چې فشار P1 (= 0.26 bar) پلي کیږي، نمونه M چیمبر ته ځي او د مخلوط چیمبر ته خارجیږي.(2) د هوا فشار P2 (= 0.12 bar) د پورټ A له لارې چمتو کیږي چې د مخلوط چیمبر لاندې سره وصل دی.که څه هم د مخلوط کولو یو شمیر میتودونو په POCT پلیټ فارمونو کې د مایعاتو مخلوط کولو کې خپل وړتیا ښودلې ده (د بیلګې په توګه د سرپینټین مخلوط 53، تصادفي مخلوط 54 او بیچ مخلوط 55)، د دوی د مخلوط کولو موثریت او اغیزمنتوب لاهم د قناعت وړ ندي.دا د بلبل مخلوط کولو طریقه غوره کوي، په کوم کې چې هوا د مخلوط کولو خونې لاندې ته معرفي کیږي ترڅو په مایع کې بلبلونه رامینځته کړي، وروسته له دې چې ځواکمن ورټیکس کولی شي په ثانیو کې بشپړ مخلوط ترلاسه کړي.د بلبل مخلوط کولو تجربې ترسره شوې او پایلې یې په ضمیمه شکل S6 کې وړاندې کیږي.دا لیدل کیدی شي کله چې د 0.10 بار فشار تطبیق شي، بشپړ مخلوط شاوخوا 8 ثانیې وخت نیسي.د 0.20 بار ته د فشار په زیاتولو سره، بشپړ مخلوط په 2 ثانیو کې ترلاسه کیږي.د مخلوط کولو موثریت محاسبه کولو میتودونه د میتودونو برخه کې وړاندې شوي.(3) د مچیو د استخراج لپاره د روبیډیم مقناطیس څخه کار واخلئ، بیا د P3 (= 0.17 bar) د پورټ P له لارې فشار ورکړئ ترڅو د فاضله خونې ته ریجنټ حرکت وکړي.په انځر.4b,c د نمونې څخه د ناپاکۍ لرې کولو لپاره د مینځلو مرحلې په لاندې ډول ښیې: (1) د مینځلو محلول A د W1 چیمبر څخه د فشار مخلوط چیمبر P1 ته خارجیږي.(2) بیا د بلبل مخلوط کولو پروسه ترسره کړئ.(3) د مینځلو محلول A د فاضله مایع چیمبر ته لیږدول کیږي، او د مخلوط کولو چیمبر کې مایکروبیډونه د مقناطیس لخوا ایستل کیږي.د W (انځور 4c) مینځل د A (Fig. 4b) مینځلو ته ورته وو.دا باید په یاد ولرئ چې د مینځلو هر ګام A او W دوه ځله ترسره شوی.شکل 4d د مچیو څخه د RNA خارجولو لپاره د elution مرحلې ښیې؛د پاکولو او مخلوط کولو مرحلې مرحلې د RNA جذب او مینځلو مرحلو ته ورته دي چې پورته تشریح شوي.لکه څنګه چې د Elution reagents د P3 او P4 (=0.23 bar) فشارونو لاندې د PCR عکس العمل خونې ته لیږدول کیږي، مهم فشار د PCR عکس العمل چیمبر د بازو مهر کولو لپاره رسیدلی.په ورته ډول، د P4 فشار هم د فاضله خونې ته د تیریدو مهر کولو کې مرسته کوي.په دې توګه، ټول elution reagents په مساوي ډول د څلورو PCR غبرګون چیمبرونو ترمنځ ویشل شوي ترڅو د ملټي پلیکس PCR تعاملات پیل کړي.پورته کړنلاره په ضمیمه فلم S6 کې وړاندې کیږي.
د RNA جذب مرحله کې، نمونه د انلیټ M ته معرفي کیږي او د مخکینۍ ذخیره شوي مالا محلول سره د مخلوط چیمبر ته داخلیږي.د دانو د مخلوط او لرې کولو وروسته، ریجنټونه د فاضله خونې ته ویشل کیږي.b او c د مینځلو مرحلې، د مخلوط کولو چیمبر ته د مخکې ذخیره شوي د مینځلو مختلف ریجنټونه معرفي کړئ، او د مچیو له مخلوطولو او لرې کولو وروسته، د فاضله مایع چیمبر ته ریجنټونه انتقال کړئ.د Elution مرحله: د elution reagents معرفي کولو، مخلوط کولو او د مچیو استخراج وروسته، reagents د PCR غبرګون چیمبر ته لیږدول کیږي.منحني د کار جریان او د مختلف مرحلو اړوند پیرامیټونه ښیې.فشار هغه فشار دی چې د انفرادي چیمبرونو له لارې ترسره کیږي.حجم د مخلوط کولو په خونه کې د مایع حجم دی.ټول پیمانه بارونه 1 سانتي متره دي.خام معلومات د خام ډیټا فایلونو په توګه چمتو شوي.
د PCR ازموینې پروسیجر ترسره شو او ضمیمه شکل S7 د تودوخې پروفایلونه وړاندې کوي په شمول د 20 دقیقې د بیرته راګرځیدو وخت او 60 دقیقې د تودوخې سایکل چلولو وخت (95 او 60 ° C) ، چې یو تودوخې دوره یې 90 s (اضافی فلم S7) دی..FAST-POCT د دودیز RT-PCR (د یو حرارتي دورې لپاره 180 ثانیې) په پرتله د حرارتي دورې (90 ثانیو) بشپړولو لپاره لږ وخت ته اړتیا لري.دا د حجم تناسب ته د لوړې سطحې ساحې او د مایکرو-PCR عکس العمل چیمبر ټیټ حرارتي غیرت لخوا توضیح کیدی شي.د چیمبر سطحه 96.6 mm2 ده او د چیمبر حجم 25 mm3 دی، چې د سطح او حجم تناسب تقریبا 3.86 جوړوي.لکه څنګه چې په ضمیمه شکل S10 کې لیدل شوي، زموږ د پلیټ فارم د PCR ازموینې ساحه په شا پینل کې نالی لري، د PCR چیمبر لاندې 200 µm ضخامت جوړوي.د تودوخې چلونکي لچک لرونکي پیډ د تودوخې کنټرولر د تودوخې سطح سره وصل دی ، د ازموینې بکس شاته سره ټینګ تماس ډاډمن کوي.دا د پلیټ فارم حرارتي جړتیا کموي او د تودوخې / یخولو موثریت ته وده ورکوي.د تودوخې سایکل چلولو په جریان کې، پارافین په پلیټ فارم کې مینځل کیږي او د PCR عکس العمل خونې ته تیریږي، د سیلانټ په توګه کار کوي ترڅو د ریجنټ تبخیر او چاپیریال ککړتیا مخه ونیسي (اضافی فلم S8 وګورئ).
پورته تشریح شوي د PCR ټول کشف پروسې په بشپړ ډول د دودیز شوي FAST-POCT وسیلې په کارولو سره اتومات شوي ، چې د برنامه شوي فشار کنټرول واحد ، د مقناطیسي استخراج واحد ، د تودوخې کنټرول واحد ، او د فلوروسینټ سیګنال نیول او پروسس کولو واحد پکې شامل دي.د یادونې وړ ده، موږ د RNA جلا کولو لپاره د FAST-POCT پلیټ فارم کارولی او بیا د PCR عکس العملونو لپاره استخراج شوي RNA نمونې د پرتله کولو لپاره د FAST-POCT سیسټم او ډیسټاپ PCR سیسټم په کارولو سره کارول شوي.پایلې تقریبا ورته وې لکه څنګه چې په ضمیمه شکل S8 کې ښودل شوي.آپریټر یو ساده دنده ترسره کوي: نمونه M-چیمبر ته معرفي کوي او پلیټ فارم وسیله ته داخلوي.د کمیتي ازموینې پایلې په شاوخوا 82 دقیقو کې شتون لري.د FAST-POCT وسیلو په اړه تفصيلي معلومات په ضمیمه شکل کې موندل کیدی شي.C9، C10 او C11.
د انفلونزا A (IAV)، B (IBV)، C (ICV) او D (IDV) ویروسونو له امله رامینځته شوی انفلونزا یوه عامه نړیواله پدیده ده.له دې څخه، IAV او IBV د ډیرو سختو پیښو او موسمي ناروغیو لپاره مسؤل دي، د نړۍ 5-15٪ نفوس اخته کوي، د 3-5 ملیون جدي پیښې رامینځته کوي او په کال کې د 290,000-650,000 مړینې لامل کیږي.تنفسي ناروغۍ 56,57د IAV او IB لومړنۍ تشخیص د ناروغۍ او اړونده اقتصادي بوج کمولو لپاره اړین دی.د شته تشخیصي تخنیکونو په منځ کې، د ریورس ټرانسکریټیس پولیمیریز چین غبرګون (RT-PCR) خورا حساس، مشخص، او دقیق (>99٪) 58,59 ګڼل کیږي.د شته تشخیصي تخنیکونو په منځ کې، د ریورس ټرانسکریټیس پولیمیریز چین غبرګون (RT-PCR) خورا حساس، مشخص، او دقیق (>99٪) 58,59 ګڼل کیږي.Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетевлеция чной и точной (> %99)58,59.د شته تشخیصي میتودونو په منځ کې، د ریورس ټرانسکریټیس پولیمیریز چین غبرګون (RT-PCR) خورا حساس، مشخص او دقیق (> 99٪) 58,59 ګڼل کیږي. Из доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетется цепностических й и точной (>99%)58,59.د شته تشخیصي میتودونو څخه، ریورس ټرانسکریپټیس پولیمیریز چین غبرګون (RT-PCR) خورا حساس، مشخص او دقیق (>99٪) 58,59 ګڼل کیږي.په هرصورت، دودیز RT-PCR میتودونه د بار بار پایپ کولو، مخلوط کولو، توزیع کولو او د مایع لیږد ته اړتیا لري، د سرچینو محدود ترتیباتو کې د متخصصینو لخوا د دوی کارول محدودوي.دلته، د FAST-POCT پلیټ فارم په ترتیب سره د IAV او IBV د PCR کشف لپاره کارول شوی ترڅو د دوی د کشف ټیټ حد (LOD) ترلاسه کړي.برسېره پردې، IAV او IBV په مختلفو ډولونو کې د مختلفو پیټوټایپونو ترمنځ توپیر کولو لپاره څو اړخیز شوي، د جینیاتي تحلیل او د ناروغۍ په سمه توګه د درملنې وړتیا لپاره یو ژمن پلیټ فارم چمتو کوي.
په انځر.5a د نمونې په توګه د 150 μl پاک شوي ویروس RNA په کارولو سره د HAV PCR ازموینې پایلې ښیې.په انځر.5a(i) ښیي چې د HAV غلظت په 106 کاپي/ml کې، د فلوروسینس شدت (ΔRn) کولی شي 0.830 ته ورسیږي، او کله چې غلظت 102 کاپی / ml ته راټیټ شي، ΔRn بیا هم 0.365 ته رسیدلی شي، کوم چې د دې څخه لوړ سره مطابقت لري. د خالي منفي کنټرول ګروپ (0.002) څخه، شاوخوا 100 ځله لوړ.د شپږو خپلواکو تجربو پر بنسټ د اندازه کولو لپاره، د IAV (Fig. 5a(ii))، R2 = 0.993، د 102-106 نقلونو/mL پورې د log غلظت او د سایکل حد (Ct) تر منځ یو خطي کیلیبریشن وکر رامینځته شوی.پایلې د RT-PCR دودیزو میتودونو سره ښه موافق دي.په انځر.5a(iii) د FAST-POCT پلیټ فارم له 40 دورو وروسته د ازموینې پایلو فلوروسینټ عکسونه ښیې.موږ وموندله چې د FAST-POCT پلیټ فارم کولی شي د 102 کاپي / mL په څیر ټیټ HAV کشف کړي.په هرصورت، دودیز میتود په 102 کاپي/mL کې د Ct ارزښت نلري، دا د 103 کاپيونو/mL LOD جوړوي.موږ داسې انګیرله چې دا ممکن د بلبل مخلوط کولو لوړ موثریت له امله وي.د PCR ازموینې تجربې په پاک شوي IAV RNA باندې ترسره شوې ترڅو د مخلوط کولو مختلف میتودونه ارزونه وکړي ، پشمول د شیک مخلوط (د مخلوط کولو ورته میتود لکه د دودیز RT-PCR عملیاتو په څیر) ، وایل مخلوط (دا میتود ، 3 s په 0.12 بار کې) او د کنټرول ګروپ په توګه هیڅ مخلوط ..پایلې په ضمیمه شکل S12 کې موندل کیدی شي.دا لیدل کیدی شي چې د لوړ RNA غلظت (106 کاپي/mL) کې، د مختلف مخلوط میتودونو Ct ارزښت تقریبا د بلبل مخلوط لپاره ورته دی.کله چې د RNA غلظت 102 کاپي/mL ته راټیټ شو، د شیک مخلوط او کنټرول د Ct ارزښت نه درلود، پداسې حال کې چې د بلبل مخلوط میتود بیا هم د 36.9 Ct ارزښت ورکړ، کوم چې د 38 د Ct حد څخه ښکته و. پایلې د غالب مخلوط ځانګړتیا ښیي. vesicles، چې په نورو ادبیاتو کې هم ښودل شوي، کوم چې ممکن دا هم تشریح کړي چې ولې د FAST-POCT پلیټ فارم حساسیت د دودیز RT-PCR په پرتله یو څه لوړ دی.په انځر.5b د پاک شوي IBV RNA نمونو د PCR تحلیل پایلې ښیي چې له 101 څخه تر 106 نقلونو/ml پورې دي.پایلې د IAV ازموینې سره ورته وې، د R2 = 0.994 او LOD د 102 نقلونو/mL لاسته راوړل.
د انفلونزا A ویروس (IAV) د PCR تحلیل د IAV غلظت له 106 څخه تر 101 کاپي/mL پورې د منفي کنټرول (NC) په توګه د TE بفر په کارولو سره.(i) د ریښتیني وخت فلوروسینس وکر.(ii) د لوګاریتمیک IAV RNA غلظت او د سایکل حد (Ct) تر مینځ د FAST او دودیز ازموینې میتودونو لپاره د خطي کیلیبریشن وکر.(iii) د 40 دورې وروسته IAV FAST-POCT فلوروسینټ عکس.b، د انفلونزا B ویروس (IBV) د PCR کشف د (i) ریښتیني وخت فلوروسینس سپیکٹرم سره.(ii) خطي کیلیبریشن وکر او (iii) د 40 دورې وروسته FAST-POCT IBV فلوروسینس عکس.د FAST-POCT پلیټ فارم په کارولو سره د IAV او IBV لپاره د کشف ټیټ حد (LOD) 102 کاپي/mL و، کوم چې د دودیزو میتودونو (103 کاپي/mL) څخه ټیټ دی.c د IAV او IBV لپاره د ملټي پلیکس ازموینې پایلې.GAPDH د مثبت کنټرول په توګه کارول شوی و او د TE بفر د منفي کنټرول په توګه کارول شوی و ترڅو د احتمالي ککړتیا او شالید پراخولو مخه ونیسي.د نمونو څلور مختلف ډولونه توپیر کیدی شي: (1) یوازې د GAPDH منفي نمونې ("IAV-/IBV-")؛(2) IAV انفیکشن ("IAV+/IBV-") د IAV او GAPDH سره؛(3) د IBV انفیکشن ("IAV-/IBV+") د IBV او GAPDH سره؛(4) IAV/IBV انفیکشن ("IAV+/IBV+") د IAV، IBV او GAPDH سره.نقطه کرښه د حد کرښه استازیتوب کوي.n = 6 بیولوژیکي خپلواکې تجربې ترسره شوي، ډاټا د ± معیاري انحراف په توګه ښودل شوي.خام ډاټا د خام ډیټا فایلونو په توګه وړاندې کیږي.
په انځر.5c د IAV/IBV لپاره د ملټي پلیکسینګ ازموینې پایلې ښیې.دلته، ویروس لیسیټ د پاک شوي RNA په ځای کې د نمونې حل په توګه کارول شوی و، او د IAV، IBV، GAPDH (مثبت کنټرول) او TE بفر (منفي کنټرول) لپاره څلور پرائمرونه د FAST-POCT پلیټ فارم څلور مختلف غبرګون چیمبرونو کې اضافه شوي.دلته مثبت او منفي کنټرولونه کارول کیږي ترڅو د احتمالي ککړتیا او شالید پرمختګ مخه ونیسي.ازموینې په څلورو ګروپونو ویشل شوي: (1) د GAPDH منفي نمونې ("IAV-/IBV-")؛(2) IAV اخته شوی ("IAV+/IBV-") د IAV او GAPDH په مقابل کې؛(3) IBV-.اخته شوی ("IAV-") -/IBV+") IBV او GAPDH؛(4) IAV/IBV ("IAV+/IBV+") د IAV، IBV او GAPDH سره انفیکشن.په انځر.5c ښیې چې کله منفي نمونې پلي شوي، د مثبت کنټرول چیمبر د فلوروسینس شدت ΔRn 0.860 و، او د IAV او IBV ΔRn منفي کنټرول (0.002) ته ورته و.د IAV+/IBV-، IAV-/IBV+ او IAV+/IBV+ ګروپونو لپاره، IAV/GAPDH، IBV/GAPDH او IAV/IBV/GAPDH کیمرې په ترتیب سره د پام وړ فلوروسینس شدت ښودلی، پداسې حال کې چې نورو کیمرونو حتی په پس منظر کې د فلوروسینس شدت ښودلی. د حرارتي سایکل چلولو وروسته د 40 کچه.د پورته ازموینو څخه، د FAST-POCT پلیټ فارم عالي ځانګړتیا وښودله او موږ ته یې اجازه راکړه چې په ورته وخت کې مختلف انفلونزا ویروسونه پیټوټایپ کړو.
د FAST-POCT د کلینیکي تطبیق تصدیق کولو لپاره، موږ د IB ناروغانو (n = 18) او غیر IB کنټرولونو (n = 18) (شکل 6a) څخه 36 کلینیکي نمونې (د پوزې سویب نمونې) ازموینه وکړه.د ناروغ معلومات په 3 ضمیمه جدول کې وړاندې شوي. د IB انفیکشن حالت په خپلواکه توګه تایید شوی او د مطالعې پروتوکول د ژیجیانګ پوهنتون لومړی اړوند روغتون (هانګزو، ژیجیانګ) لخوا تصویب شوی.د ناروغانو هر نمونه په دوه کټګوریو ویشل شوې وه.یو د FAST-POCT په کارولو سره پروسس شوی او بل یې د ډیسټاپ PCR سیسټم (SLAN-96P، چین) په کارولو سره پروسس شوی.دواړه معاینات ورته د پاکولو او کشف کټونه کاروي.په انځر.6b د FAST-POCT او دودیز ریورس ټرانسکرپشن PCR (RT-PCR) پایلې ښیې.موږ د فلوروسینس شدت (FAST-POCT) د -log2 (Ct) سره پرتله کړ، چیرته چې Ct د دودیز RT-PCR لپاره د دورې حد دی.د دواړو میتودونو ترمنځ ښه موافقه وه.FAST-POCT او RT-PCR د پییرسن تناسب (r) ارزښت د 0.90 (شکل 6b) سره قوي مثبت اړیکه ښودلې.موږ بیا د FAST-POCT د تشخیص دقیقیت ارزونه وکړه.د مثبت او منفي نمونو لپاره د فلوروسینس شدت (FL) توزیع د خپلواک تحلیلي اندازې په توګه چمتو شوي (انځور 6c).د FL ارزښتونه د کنټرول په پرتله د IB ناروغانو کې د پام وړ لوړ وو (****P = 3.31 × 10-19؛ دوه ګونی ټیسټ) (انځور 6d).بیا، د IBV رسیدونکي عملیاتي ځانګړتیاوې (ROC) منحني پلاټ شوي.موږ وموندله چې د تشخیص دقت خورا ښه و، د 1 د وکر لاندې ساحه سره (انځور 6e).مهرباني وکړئ په یاد ولرئ چې د 2020 پورې د COVID-19 له امله په چین کې د لازمي ماسک امر کولو له امله ، موږ د IBD ناروغان ندي پیژندلي ، نو ټول مثبت کلینیکي نمونې (د بیلګې په توګه ، د ناک سویب نمونې) یوازې د IBV لپاره وې.
د کلینیکي مطالعې ډیزاین.ټولټال 36 نمونې، په شمول د 18 ناروغانو نمونې او 18 غیر انفلونزا کنټرولونه، د FAST-POCT پلیټ فارم او دودیز RT-PCR په کارولو سره تحلیل شوي.b د FAST-POCT PCR او دودیز RT-PCR ترمنځ تحلیلي ثبات ارزونه.پایلې په مثبت ډول سره تړاو درلود (Pearson r = 0.90).c په 18 IB ناروغانو او 18 کنټرولونو کې د فلوروسینس شدت کچه.d د IB ناروغانو کې (+)، د FL ارزښتونه د کنټرول ګروپ (-) په پرتله د پام وړ لوړ وو (****P = 3.31 × 10-19؛ دوه ګونی ټ-ټیسټ؛ n = 36).د هر مربع پلاټ لپاره، په مرکز کې تور مارکر منځنی استازیتوب کوي، او د بکس لاندې او پورتنۍ کرښې په ترتیب سره د 25 او 75 سلنې استازیتوب کوي.ویسکرز لږترلږه او اعظمي ډیټا پوائنټونو ته غزیدلی ، کوم چې بهر نه ګڼل کیږي.e ROC وکر.د ډټ شوي کرښه d د ROC تحلیل څخه اټکل شوي حد ارزښت څرګندوي.د IBV لپاره AUC 1 دی. خام ډیټا د خام ډیټا فایلونو په توګه چمتو کیږي.
پدې مقاله کې ، موږ FAST وړاندې کوو ، کوم چې د مثالي POCT لپاره اړین ځانګړتیاوې لري.زموږ د ټیکنالوژۍ ګټې په لاندې ډول دي: (1) څو اړخیز خوراک (کاسکیډ، یوځل، ترتیب او انتخاب)، د غوښتنې پر اساس خوشې کول (د پلي شوي فشار چټک او متناسب خوشې کول) او د باور وړ عملیات (په 150 درجو کې کمپن) (2) اوږدمهاله ذخیره (د ګړندۍ ازموینې دوه کاله ، د 0.3٪ په اړه د وزن له لاسه ورکول)؛(3) د مایعاتو سره د کار کولو وړتیا د پراخه رطوبت او ویسکوسیت سره (واسکوسیت تر 5500 cP پورې)؛(4) اقتصادي (د FAST-POCT PCR وسیلې اټکل شوي مادي لګښت نږدې US$1 دی).د څو اړخیزو ډسپنسرونو په یوځای کولو سره، د انفلوینزا A او B ویروسونو د PCR کشف لپاره د FAST-POCT یوځای شوی پلیټ فارم ښودل شوی او پلي شوی.FAST-POCT یوازې 82 دقیقې وخت نیسي.کلینیکي ازموینې د 36 پوزې سویب نمونو سره د معیاري RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) سره د فلوروسینس شدت کې ښه همغږي ښودلې.کلینیکي ازموینې د 36 پوزې سویب نمونو سره د معیاري RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) سره د فلوروسینس شدت کې ښه همغږي ښودلې.د ‏‎Клинические тесты‎‏ پاڼې اړوند نور معلومات په فسبوک کې اوګورئ irsona > 0,9).کلینیکي ازموینې د 36 پوزې سویبونو نمونو سره د معیاري RT-PCR (Pearson's coefficients> 0.9) د فلوروسینس شدت سره ښه موافقه ښودلې. RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков из носа показали хорошее совпадение интенсивности флуоресценции со-станоресценции со irsona > 0,9).د 36 پوزې سویب نمونو کلینیکي ازموینې د معیاري RT-PCR (Pearson Coefficient> 0.9) سره د فلوروسینس شدت ښه موافقه ښودلې.د دې کار سره موازي، مختلف راڅرګندېدونکي بایو کیمیکل میتودونه (د بیلګې په توګه، د پلازما تودوخې سایکل چلول، د امپلیفیکیشن څخه پاک معافیت، او د نانوبوډ فعالیت کولو ارزونه) په POCT کې خپل وړتیا ښودلې.په هرصورت، د بشپړ مدغم او قوي POCT پلیټ فارم نشتوالي له امله، دا میتودونه په لازمي ډول د پروسس کولو دمخه جلا جلا پروسیجرونو ته اړتیا لري (د بیلګې په توګه، RNA انزوا 44، انکیوبیشن45 او وینځل)، کوم چې د دې میتودونو سره اوسني کار نور هم بشپړوي ترڅو د POCT پرمختللي فعالیتونه پلي کړي. اړین پیرامیټونه.په ځواب کې د تولید فعالیت راوړل.په دې کار کې، که څه هم د FAST والو د فعالولو لپاره کارول شوی هوا پمپ دومره کوچنی دی چې د بنچ ټاپ وسیلې (انځور S9، S10) کې مدغم شي، دا لاهم د پام وړ بریښنا مصرفوي او شور تولیدوي.په اصولو کې، کوچني فارم فاکتور نیوماتیک پمپونه د نورو وسیلو لخوا بدلیدلی شي، لکه د بریښنایی مقناطیسي ځواک کارول یا د ګوتو عمل.نور پرمختګونه ممکن شامل وي، د بیلګې په توګه، د مختلفو او ځانګړو بایو کیمیکل ارزونو لپاره د کټونو تطبیق، د نوي کشف میتودونو کارول چې د تودوخې / یخولو سیسټمونو ته اړتیا نلري، پدې توګه د PCR غوښتنلیکونو لپاره د وسیلې څخه پاک POCT پلیټ فارم چمتو کول.موږ باور لرو چې د دې په پام کې نیولو سره چې د FAST پلیټ فارم د مایعاتو د مینځلو لپاره لاره چمتو کوي ، موږ باور لرو چې وړاندیز شوې FAST ټیکنالوژي نه یوازې د بایو میډیکل ازموینې لپاره ، بلکه د چاپیریال نظارت ، د خواړو کیفیت ازموینې ، موادو او درملو ترکیب لپاره هم د ګډ پلیټ فارم رامینځته کولو احتمال وړاندې کوي. ..
د انسان د پوزې سویب نمونو راټولول او کارول د ژیجیانګ پوهنتون د لومړي مربوط روغتون (IIT20220330B) د اخالقي کمیټې لخوا تصویب شوي.36 د پوزې سویب نمونې راټولې شوې، چې 16 د 30 کلونو څخه کم عمر لرونکي، 7 لویان> 40 کلن، او 19 نارینه، 17 ښځینه شاملې وې.36 د پوزې سویب نمونې راټولې شوې، چې 16 د 30 کلونو څخه کم عمر لرونکي، 7 لویان> 40 کلن، او 19 نارینه، 17 ښځینه شاملې وې.Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 взрослых старще, 40 ж19ж7ут старщичинж19.د 16 پوزه سویب نمونې د 16 لویانو څخه د 30 کلونو څخه کم عمر لرونکي، 7 لویان د 40 کالو څخه پورته، 19 نارینه او 17 میرمنې راټول شوي..د ډیموګرافیک معلومات په 3 ضمیمه جدول کې وړاندې شوي. د ټولو ګډون کونکو څخه باخبر رضایت ترلاسه شوی.ټول ګډونوال د انفلونزا په درلودلو شکمن شوي وو او پرته له تاوان څخه په داوطلبانه توګه معاینه شوي.
FAST اساس او پوښ د پولیلیکټیک اسید (PLA) څخه جوړ شوی او د انډر 3 پرو 3D پرنټر (شینزین ټرانسکینډ 3D ټیکنالوژۍ شرکت ، لمیټډ) لخوا چاپ شوی.دوه اړخیزه ټیپ د Adhesives Research, Inc. ماډل 90880 څخه پیرودل شوی. د PET فلم 100 µm ضخامت د McMaster-Carr څخه اخیستل شوی.چپکونکي او PET فلم دواړه د Silhouette America, Inc څخه د Silhouette Cameo 2 کټر په کارولو سره پرې شوي. لچک لرونکي فلم د انجیکشن مولډینګ په واسطه د PDMS موادو څخه جوړ شوی.لومړی، د 200 µm ضخامت PET چوکاټ د لیزر سیسټم په کارولو سره پرې شوی او د 100 µm دوه اړخیز چپکونکي ټیپ په کارولو سره د 3 ملي میتر ضخامت PMMA شیټ سره چپ شوی.د PDMS مخکینۍ (Sylgard 184؛ برخه A: Part B = 10:1، Dow Corning) بیا په مولډ کې واچول شو او د اضافي PDMS لرې کولو لپاره د شیشې راډ وکارول شو.د 3 ساعتونو لپاره په 70 درجې سانتي ګراد کې د درملنې وروسته، د 300 μm ضخامت PDMS فلم کیدای شي له مولډ څخه پاک شي.
د هر اړخیز توزیع لپاره عکسونه ، د غوښتنې پراساس خپرونه او د اعتبار وړ فعالیت د لوړ سرعت کیمرې (سوني AX700 1000 fps) سره اخیستل کیږي.د اعتبار ازموینې کې کارول شوي اوربیټل شیکر د SCILOGEX (SCI-O180) څخه اخیستل شوی.د هوا فشار د هوا کمپرسور لخوا رامینځته کیږي ، او د فشار ارزښت تنظیم کولو لپاره ډیری ډیجیټل دقیق فشار تنظیم کونکي کارول کیږي.د جریان چلند ازموینې پروسه په لاندې ډول ده.د مایع یوه ټاکل شوې اندازه د ازموینې وسیلې ته داخل شوې وه او د جریان چلند ثبتولو لپاره د لوړ سرعت کیمره کارول شوې وه.بیا هم عکسونه په ټاکلي وختونو کې د جریان چلند له ویډیوګانو څخه اخیستل شوي ، او پاتې ساحه د امیج پرو پلس سافټویر په کارولو سره محاسبه شوې ، کوم چې بیا د حجم محاسبه کولو لپاره د کیمرې ژوروالي لخوا ضرب شوی.د جریان چلند ازموینې سیسټم توضیحات په ضمیمه شکل S4 کې موندل کیدی شي.
50 µl مایکروبیډونه او 100 µl ډیونیز شوي اوبه د شیشې مخلوط کولو وسیلې ته داخل کړئ.د ګډ فعالیت عکسونه د لوړ سرعت کیمرې سره په هر 0.1 ثانیو کې د 0.1 بار ، 0.15 بار او 0.2 بار فشارونو کې اخیستل شوي.د مخلوط پروسې په جریان کې د پکسل معلومات د عکس پروسس کولو سافټویر (فوټوشاپ CS6) په کارولو سره له دې عکسونو څخه ترلاسه کیدی شي.او د اختلاط موثریت د لاندې مساواتو 53 سره ترلاسه کیدی شي.
چیرته چې M د مخلوط کولو موثریت دی، N د نمونې د پکسلونو ټولیز شمیر دی، او ci او \(\bar{c}\) نورمال شوي او تمه شوي نورمال شوي غلظت دي.د مخلوط کولو موثریت له 0 (0٪، غیر مخلوط) څخه تر 1 (100٪، بشپړ مخلوط) پورې اړه لري.پایلې په ضمیمه شکل S6 کې ښودل شوي.
د IAV او IBV لپاره د ریښتیني وخت RT-PCR کټ، په شمول د IAV او IBV RNA نمونې (د بلی نمبر. RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, China)، Tris-EDTA بفر (TE بفر شمیره. B541019 ، سنګون بایوټیک، چین)، د مثبت کنټرول RNA پاکولو کټ (برخه نمبر Z-ME-0010، Liferiver، China) او GAPDH حل (برخه نمبر M591101، سنګون بایوټیک، چین) په سوداګریز ډول شتون لري.د RNA پاکولو کټ کې یو پابند بفر، واش A، واش W، eluent، مقناطیسي مایکروبیډونه، او یو اکریلیک کیریر شامل دي.IAV او IBV ریښتیني وخت RT-PCR کټونو کې د IFVA نیوکلیک اسید PCR کشف مکس او RT-PCR انزایم شامل دي.6 µl AcrylCarrier او 20 µl مقناطیسي موتی په 500 µl د پابند بفر محلول کې اضافه کړئ، ښه وخورئ او بیا د مالګې محلول چمتو کړئ.د A او W په مینځلو کې 21 ملی لیتر ایتانول اضافه کړئ، په ترتیب سره د A او W د مینځلو محلولونو ترلاسه کولو لپاره ښه وخورئ.بیا، د IFVA نیوکلیک اسید سره 18 µl فلوروسینټ PCR مخلوط او 1 µl RT-PCR انزایم په 1 µl TE محلول کې اضافه شوي ، د څو ثانیو لپاره شاک او سینټرفیوژ شوي ، د 20 µl IAV او IBV پریمر ترلاسه کول.
د RNA د پاکولو لاندې کړنلاره تعقیب کړئ: (1) د RNA جذب.526 μl د ګولی محلول په 1.5 ملی لیتر سینټرفیوج ټیوب کې پایپټ کړئ او 150 μl نمونه اضافه کړئ ، بیا په لاسي ډول ټیوب 10 ځله پورته او ښکته کړئ.676 µl مخلوط د 1.88 x 104 g سره د 60 ثانیو لپاره د تړاو کالم او سنټرفیوج ته انتقال کړئ.ورپسې ډنډونه بیا له مینځه وړل کیږي.(۲) د مينځلو لومړۍ مرحله.500 µl د مینځلو محلول A په تړاو کالم کې اضافه کړئ، په 1.88 x 104 ګرام کې د 40 s لپاره سینټرفیوج کړئ، او مصرف شوي محلول رد کړئ.دا د مینځلو پروسه دوه ځله تکرار شوې.(۳) د مينځلو دوهمه مرحله.500 µl د مینځلو محلول W د تړاو کالم ته اضافه کړئ، په 1.88 × 104 g کې د 15 s لپاره سینټرفیوج کړئ او مصرف شوي محلول رد کړئ.دا د مینځلو پروسه دوه ځله تکرار شوې.(4) Elution.200 µl eluate د 2 دقیقو لپاره په 1.88 x 104 ګرامه سینټرفیوج او د تړاو کالم ته اضافه کړئ.(5) RT-PCR: ایلویټ په PCR ټیوب کې د پریمر محلول 20 μl کې انجیکشن شوی و ، بیا ټیوب د RT-PCR پروسې ترسره کولو لپاره په ریښتیني وخت PCR ټیسټ اپریټس (SLAN-96P) کې کیښودل شو.د کشف ټوله پروسه نږدې 140 دقیقې وخت نیسي (20 دقیقې د RNA پاکولو لپاره او 120 دقیقې د PCR کشف لپاره).
526 µl د مالا محلول، 1000 µl د واش محلول A، 1000 µl د مینځلو محلول W، 200 µl ایلویټ او 20 µl پرائمر محلول په ابتدايي توګه د M, W1, W2, E او PCR کشف چیمبرونو کې اضافه شوي او زیرمه شوي.د پلیټ فارم مجلس.بیا، د نمونې 150 μl په چیمبر M کې پایپټ شوی او د FAST-POCT پلیټ فارم د ازموینې وسیلې ته داخل شوی چې په ضمیمه شکل S9 کې ښودل شوی.شاوخوا 82 دقیقې وروسته ، د ازموینې پایلې شتون درلود.
پرته لدې چې بل ډول یادونه وشي ، د ازموینې ټولې پایلې د لږترلږه شپږ نقلونو وروسته یوازې د FAST-POCT پلیټ فارم او بیولوژیکي خپلواکه نمونو په کارولو سره د ± SD په توګه وړاندې کیږي.هیڅ معلومات د تحلیل څخه ندي ایستل شوي.تجربې تصادفي ندي.څیړونکي د تجربې په جریان کې د ډله ایزو دندو لپاره سترګې پټې نه وې.
د مطالعې ډیزاین په اړه د لا زیاتو معلوماتو لپاره، د دې مقالې سره تړلی د طبیعت څیړنې راپور لنډیز وګورئ.
د دې مطالعې د پایلو مالتړ معلومات په اضافي معلوماتو کې شتون لري.دا مقاله اصلي معلومات وړاندې کوي.
Chagla, Z. & Madhukar, P. په بډایه هیوادونو کې د COVID-19 بوسټر به د ټولو لپاره واکسین وځنډوي.Chagla, Z. & Madhukar, P. په بډایه هیوادونو کې د COVID-19 بوسټر به د ټولو لپاره واکسین وځنډوي.Chagla, Z. او Madhukar, P. په بډایه هیوادونو کې د COVID-19 وده کونکي به د هرچا لپاره واکسین وځنډوي.Chagla, Z. and Madhukar, P. په بډایه هیوادونو کې د COVID-19 بیا واکسین کول به د هرچا لپاره واکسین وځنډوي.ملي درمل.27، 1659-1665 (2021).
فاوست، L. et al.د SARS-CoV-2 ازموینه په ټیټ او متوسط ​​​​عاید لرونکو هیوادونو کې: د خصوصي روغتیا پاملرنې سکتور کې شتون او وړتیا.مایکروبیل انفیکشن.22، 511-514 (2020).
د روغتیا نړیوال سازمان.د غوره شوي درملنې وړ جنسي لیږد شوي انتاناتو نړیوال خپریدل او پیښې: بیاکتنه او اټکلونه.جینیوا: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001).
Fenton, EM et al.ډیری 2D مولډ شوي اړخ جریان ټیسټ سټیپونه.د ASS غوښتنلیک.الما ماټرانټر میلان1، 124-129 (2009).
Schilling, KM et al.په بشپړ ډول تړل شوي مایکرو فلوایډیک کاغذ پراساس تحلیلي وسیله.مقعدکیمیاوي.84، 1579-1585 (2012).
لیپینټر، N. et al.رقابتي کاغذ پراساس امونوکروماتوګرافي د انزایم بدل شوي الیکټروډونو سره یوځای د ادرار کوټینین بې سیمه نظارت او الیکټرو کیمیکل تعیین ته اجازه ورکوي.سینسر 21، 1659 (2021).
Zhu، X. et al.د ګلوکومیټر په کارولو سره د څو اړخیز نانوزیم - مدغم پس منظر مایع پلیټ فارم سره د ناروغۍ بایو مارکر مقدار کول.بیولوژیکي سینسربایو الکترونیکی.126، 690-696 (2019).
بو، S. et al.د امیندوارۍ ازموینې پټه د کانکانالین A-Human chorionic gonadotropin-Cu3(PO4)2 هایبرډ نانوفلورونو په کارولو سره د رنځجنیک باکتریا کشف کولو لپاره ، مقناطیسي جلا کول او د سمارټ فون لوستل.مایکرو کمپیوټر.مجله.۱۸۵، ۴۶۴ (۲۰۱۸).